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運動發酵單胞菌和大腸桿菌間穿梭質粒的構建
運動發酵單胞菌(Zymomonas.mobilis)是目前發現的乙醇發酵能力最強的微生物之一,被認為是進行大規模乙醇生產的潛在菌種;但由于其可利用的碳源范圍窄,所以對其進行基因工程改造首先需要有較好的載體系統.以Z.mobilis內源質粒pZM2和大腸桿菌(E.coli)質粒pBR328、pACYC184為出發質粒,構建了三個Z.mobilis-E.coli之間的克隆型穿梭質粒,即pZB1、pZB21和pZB31.對它們在Z.mobilis CP4中的穩定性、拷貝數的初步比較分析表明:pZB21最穩定、拷貝數最高,pZB31次之,pZB1最差.進一步以pZB21為載體,在Z.mo-bilis CP4中表達E.coli的talB基因,酶活水平為0.087 U/mg蛋白.證明pZB21是能用于基因表達的、較為理想的Z.moblis-E.coli之間的穿梭載體.
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