金環蛇L-氨基酸氧化酶誘導人臍靜脈內皮細胞凋亡的研究

目的:探討金環蛇毒中L-氨基酸氧化酶對人臍靜脈內皮細胞株(HUVCE)增殖和凋亡作用的影響.方法:通過陽離子交換層析和肝素親和層析從金環蛇蛇毒中分離純化到一個L-氨基酸氧化酶,SDS電泳鑒定其純度.SDS電泳和HPLC凝膠過濾確定其分子量,并采用MTT法、流式細胞術、激光共聚焦顯微鏡檢測L-氨基酸氧化酶對人臍靜脈內皮細胞株生長情況、細胞周期以及細胞形態的影響.結果:通過兩步層析法從金環蛇毒中分離得到L-氨基酸氧化酶,L-氨基酸氧化酶的表觀分子量通過SDS-PAGE測定約為60 kD,通過凝膠過濾測定分子量為70kD.L-氨基酸氧化酶作用于HUVCE細胞12 h后,細胞的生長明顯受到抑制,L-氨基酸氧化酶作用的半數抑制量為2.8 mg/L.流式細胞儀直方圖上可見明顯的亞二倍體峰,隨著L-氨基酸氧化酶作用濃度的增加,凋亡率增加(P<0.05),細胞分裂增殖指數降低(P<0.05);激光共聚焦顯微鏡觀察0.03 mg/L的L-氨基酸氧化酶作用12 h細胞出現早期凋亡,3 mg/L的L-氨基酸氧化酶作用12 h細胞核濃縮,部分細胞碎裂.結論:通過兩步層析法從金環蛇毒中分離得到L-氨基酸氧化酶,該氨基酸氧化酶是由單亞基組成的.L-氨基酸氧化酶能誘導HUVCE凋亡從而對其生長具有抑制作用.

作 者： 魏繼福 楊海偉 喬麗雅 魏曉龍 何韶衡 WEI Ji-fu YANG Hai-wei QIAO Li-ya WEI Xiao-long HE Shao-heng   作者單位： 汕頭大學醫學院變態反應學與炎癥反應學研究所,廣東,汕頭,515031  刊 名： 中國病理生理雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號： Q51  關鍵詞： 氨基酸氧化酶   內皮細胞   細胞周期   細胞凋亡  

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