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家蠅防御素defensin cDNA的克隆及在畢赤酵母中的表達

時間:2023-04-30 09:40:38 生物醫學論文 我要投稿
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家蠅防御素defensin cDNA的克隆及在畢赤酵母中的表達

提取家蠅總RNA,RT-PCR擴增編碼家蠅防御素defensin的cDNA,克隆并測定了其序列,將該cDNA序列與酵母表達載體pPICZαA重組,構建酵母分泌型表達載體pPICZα-de,電激法轉化畢赤酵母(Pichia pastoris)受體菌GS115.經表型篩選和PCR鑒定證明目的片段已穩定整合到酵母染色體基因組中.在含不同濃度的Zeocin平板上篩選到高拷貝整合的轉化子,陽性克隆經甲醇誘導表達,用Tricine-SDS-PAGE確定了表達產物的正確性,瓊脂孔穴平板擴散法、比濁法測定了表達產物的活性,對金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus具有一定的殺菌活性.

作 者: 金豐良 許小霞 趙士煒 古德祥 張文慶 JIN Feng-liang XU Xiao-xia ZHAO Shi-wei GU De-xiang ZHANG Wen-qing   作者單位: 中山大學有害生物控制與資源利用國家重點實驗室,廣東,廣州,510275  刊 名: 中山大學學報(自然科學版)  ISTIC PKU 英文刊名: ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI  年,卷(期): 2006 45(3)  分類號: Q78  關鍵詞: 家蠅   防御素   畢赤酵母   誘導表達   活性測定  

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