細菌的鑒定

細菌的鑒定介紹：

細菌的鑒定是對細菌進行各方面的檢查。例如：細菌對于碳水化合物的代謝試驗、吲哚試驗、淀粉的水解等各種試驗。

細菌的鑒定正常值：

胃腸道的正常菌群可分為需氧菌、兼性厭氧菌和厭氧菌。最居優勢的是厭氧菌，占菌群總數的99%，其中僅類桿菌和雙歧桿菌就占90%，而乳桿菌和雙歧桿菌可與我們終生相隨。這些正常菌群的種類以及比例均正常。

細菌的鑒定臨床意義：

有些細菌可以分解色氨酸生成吲哚可以與二甲基氨基苯甲醛反應生成紅色的玫瑰吲哚，因此可根據細菌能否分解色氨酸產生吲哚來鑒定菌種。

異常結果：1. 腸道的內環境不處于動態平衡，正常細菌的比例失調。 痛、胃酸、胃脹、腹瀉、腹痛、下墜、膿血便等癥狀，嚴重時還會引起消化道出血、穿孔、誘發癌變，如胃癌、結腸癌等。 2. 埃希氏菌引起腸道外感染，特別是泌尿道感染。枸櫞酸桿菌屬引起原發性枸櫞酸桿菌肺炎或繼發性枸櫞酸桿菌肺炎。病理改變主要表現為支氣管肺炎，可有肺泡壁破壞形成小膿腫及局灶性出血�？死撞�菌屬引起的呼吸道感染 、敗血癥、化膿性腦膜炎、尿路感染等臨床癥狀。還有沙門菌屬、變形桿菌屬等引起的各種異常癥狀。3. 某些細菌水解淀粉并利用其水解產物，有產酸產氣導致人體的不適。

需要檢查的人群： 有消化道出血、穿孔、誘發癌變等各種細菌感染癥狀者。

細菌的鑒定注意事項：

不合宜人群： 暫時不明

檢查前禁忌：要保持良好的作息習慣，注意正常的飲食習慣。

檢查時要求：積極配合醫生

細菌的鑒定檢查過程：

一. 吲哚試驗

方法：以接種環接種待試細菌的新鮮斜面培養物于鄧亨氏蛋白胨溶液中， 37℃培養24～48小時后(可延長4～5天)。于培養液中加入戊醇或二甲苯2～3ml，搖勻，靜置片刻后，沿試管壁加入試劑2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液體變紅色者為陽性反應。

也可將一指頭大的脫脂棉，滴上兩滴歐立希氏試劑，再在同處加滴兩滴高硫酸鉀(K2S2O4)飽和水溶液，置于含培養液的被檢試管中，離液面約半寸，置燒杯內水浴煮沸為止，脫脂棉上出現紅色為陽性。此法略繁，但省試劑且準確，因為將試劑加到液體中，吲哚和糞臭素均呈陽性，而用此法，只是吲哚(它能揮發)呈陽性反應。

亦可以濾紙片浸濕1%的二甲基苯丙烯甲醛的10%濃HCl溶液，然后以接種環刮取一環瓊脂的純培養物涂布于該濾紙上。

細菌涂印周圍呈藍色者為陽性，細菌涂印周圍無色澤變化或淡黃色者為陰性。

二. 淀粉的水解

淀粉在酸的催化作用下，能發生水解;淀粉的水解過程：先生成分子量較小的糊精(淀粉不完全水解的產物)，糊精繼續水解生成麥芽糖，最終水解產物是葡萄糖。

對劑：碘化鉀 2g 蒸餾水 300ml

培養基：將細菌接種在平板上，置37度溫箱中培養24h，加革蘭氏碘液于菌落上，觀察顏色變化，呈藍色者為陰性，無藍色為陽性。

三. β-半乳糖苷酶試驗

試劑：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液(6.9g NaH2P04溶于45ml蒸餾水中，用30% NaOH調整pH為7.0，再加水至50ml)5ml，置4℃冰箱中保存。

方法：取純菌落用無菌生理鹽水制成濃的菌懸液，加入0.25ml ONPG液，置35℃水浴20min至3h，觀察結果。

結果判定：通常在20～30min內顯色。出現黃色為陽性反應。

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