增強UV-B輻射對小麥幼苗基因組DNA的影響及RAPD分析體系的建立

采用改進的CTAB法提取小麥總基因組DNA,并以之為模板對RAPD反應體系中的一些重要參數進行梯度試驗,建立了一套適合本研究的最佳反應體系.即25 μL反應體系:模板DNA 20 ng、引物濃度0.5 μmol/L、dNTPs 濃度200 μmol/L、Taq酶0.750 U.反應程序:94℃預變性2 min,94℃變性30 s,38℃退火30 s,72℃延伸30 s,30個循環,72℃延伸10 min,4℃保存.此外,利用擴增結果穩定的引物對正常光照組及增強UV-B輻射處理組的小麥DNA進行RAPD分析.結果表明,增強UV-B輻射處理組的DNA,經引物S22、S40擴增后分別出現了分子量為2 144 bp和2 082 bp的差異條帶,這能否從一定程度上揭示UV-B對植物造成損傷的分子生物學機制,還有待進一步的研究.

作 者： 李苗 高麗美 李永鋒 韓榕   作者單位： 山西師范大學生命科學學院,臨汾,041004  刊 名： 生物技術通報  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010 ""(5)  分類號：   關鍵詞： 小麥   UV-B輻射   CTAB法   RAPD分析   差異條帶  

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