丙酮對鋸緣青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力與構(gòu)象的影響

以丙酮為效應(yīng)物,研究其對鋸緣青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影響,結(jié)果表明:該酶的剩余活力隨著丙酮濃度增大而呈指數(shù)下降,當(dāng)丙酮濃度達25%,酶的剩余活力僅為20%,說明丙酮對青蟹NA-Gase有明顯的失活作用.導(dǎo)致酶活力喪失50%的丙酮濃度為7.5%.在較低丙酮濃度(＜10%)的失活是可逆的反應(yīng)過程.動力學(xué)研究表明,該酶的失活過程屬于混合型,并進一步測定游離酶(E)和酶底物絡(luò)合物(ES)與丙酮的結(jié)合常數(shù)(K1和K1s),分別為4.06%和10.49%,K1＜K1s,說明底物存在對酶被丙酮的失活作用有一定的保護作用.應(yīng)用熒光發(fā)射光譜研究青蟹NAGase經(jīng)丙酮微擾后的分子構(gòu)象變化情況,結(jié)果表明:丙酮對酶分子構(gòu)象有顯著的影響,酶的內(nèi)源熒光強度隨丙酮濃度增大而降低,說明酶分子中的生色基團Trp和Tyr殘基的微環(huán)境發(fā)生了變化.

作 者： 楊學(xué)敏 王勤 謝進金 張繼平 林建成 陳清西 YANG Xue-min WANG Qin XIE Jin-jin ZHANG Ji-ping LIN Jian-cheng CHEN Qing-xi   作者單位： 楊學(xué)敏,YANG Xue-min(漳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院)

王勤,謝進金,張繼平,林建成,陳清西,WANG Qin,XIE Jin-jin,ZHANG Ji-ping,LIN Jian-cheng,CHEN Qing-xi(廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,細胞生物學(xué)與腫瘤細胞工程教育部重點實驗室,福建,廈門,361005) 

刊 名： 廈門大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 45(2)  分類號： Q356.1  關(guān)鍵詞： 鋸緣青蟹   N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶   丙酮   失活作用   構(gòu)象變化  

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