體外培養(yǎng)人樹突狀細胞分化成熟特性分析

目的利用人臍血CD34+干細胞誘導分化樹突狀細胞(DC),并對DC分化發(fā)育過程的生物學特性進行鑒定和分析.方法通過SCF、GM-CSF、TGF-β1、Flt-3L及TNF-α體外培養(yǎng)體系,從臍血CD34+造血干細胞中誘導擴增獲得DC.采用倒置顯微鏡和電鏡觀察DC形態(tài)學特征,流式細胞儀檢測DC細胞表型及胞內(nèi)活性氧(ROS)水平,MTT比色法檢測DC刺激同種異體T細胞增殖能力;ELISA法檢測DC培養(yǎng)上清液中IL-12含量.結(jié)果CD34+細胞培養(yǎng)5至7 d,細胞呈現(xiàn)DC典型樹突狀形態(tài),處未成熟狀態(tài),再經(jīng)TNF-α誘導及繼續(xù)培養(yǎng)至14 d,DC發(fā)育成熟.未成熟DC表達模式識別受體CD209(DC-SIGN),且胞內(nèi)蓄積適量ROS,具備了細胞吞噬能力.成熟DC除仍高表達DC-SIGN,其表面黏附共刺激分子CDllc、CD54、CD83、CD80、CD86表達上調(diào),細胞因子IL-12分泌增加,且具明顯的體外刺激T細胞增殖能力,符合于抗原遞呈細胞特征.此外,未成熟和成熟DC基本不表達黏附分子P-、E-選擇素,但未成熟和成熟DC分別高表達和低表達L-選擇素.結(jié)論建立人DC體外模型及其分化發(fā)育生物學特性分析,為進一步研究DC功能,以及利用DC調(diào)控免疫應答用于疾病防治提供了基礎(chǔ).

作 者： 張玉梅 孫桂芝 周同 趙亞鵬 張雁云 張冬青 陳楠   作者單位： 張玉梅,孫桂芝,周同,趙亞鵬,陳楠(200025,上海,上海交通大學醫(yī)學院瑞金醫(yī)院腎內(nèi)科)

張雁云,張冬青(上海交通大學醫(yī)學院上海市免疫學研究所) 

刊 名： 中國微循環(huán)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CHINESE MICROCIRCULATION  年，卷(期)： 2006 10(1)  分類號： Q25  關(guān)鍵詞： 樹突狀細胞   分化   生物學特性  

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