木瓜凝乳蛋白酶的單甲氧基聚乙二醇化學修飾及其對酶活力和抗原性的影響

目的研究木瓜凝乳蛋白酶(Cp)的單甲氧基聚乙二醇(mPEG)化學修飾對酶活力和抗原性的影響,為該酶的修飾改性提供實驗依據.方法在底物保護和無底物保護下,分別以單甲氧基聚乙二醇的兩種活化產物mPEG1和mPEG2對木瓜凝乳蛋白酶進行共價修飾,以三硝基苯磺酸法測定各修飾酶的平均氨基修飾度;以大分子酪蛋白和小分子BAEE為底物分別測定各修飾酶的酶活性;以ELISA法檢測各修飾酶的抗原性.結果①mpEG1和mPEG2修飾均能降低及消除酶的抗原性,其中mPEG2的效果更為明顯.②二者的化學修飾均使酶活力有所下降,其中mPEG1修飾酶的酶活力(分別以酪蛋白和BAEE為作用底物,下同)均高于mPEG2修飾酶的酶活力(尤其是當底物為大分子蛋白質時).③底物保護下的修飾酶酶活力均顯著高于無底物保護的酶活力.結論以mPEG1為修飾劑,在底物保護下的Cp修飾能在消除抗原性的同時,獲得仍具較高酶活力的修飾酶.

作 者： 舒薇 房師松 崔堂兵 郭勇 Shu Wei Fang Shi-song Cui Tang-bing Guo Yong   作者單位： 舒薇,Shu Wei(華南農業大學測試中心,廣州,510642)

房師松,Fang Shi-song(深圳市疾病預防控制中心)

崔堂兵,郭勇,Cui Tang-bing,Guo Yong(華南理工大學生物科學與工程學院) 

刊 名： 衛生研究  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH  年，卷(期)： 2006 35(3)  分類號： Q814 Q556.9 R446.6  關鍵詞： 木瓜凝乳蛋白酶   單甲氧基聚乙二醇(mPEG)   化學修飾   酶活力   抗原性  

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