誘騙受體DcR3的基因構建、表達及特異性鑒定

目的: 構建適于原核表達的人誘騙受體DcR3基因, 并進行重組蛋白的表達純化及特異性鑒定.方法: 查得人DcR3 Cdna全序列, 將其分段設計引物, 通過重疊PCR獲得DcR3基因.構建Pet-22b(+)/DcR3表達載體, 轉化大腸桿菌Rosseta-gami, IPTG誘導表達, Ni柱純化.采用ELISA進行特異性鑒定.結果: 通過重疊PCR獲得了編碼正確氨基酸序列的目的基因.目的蛋白以包涵體的形式表達, 表達量占菌體總蛋白的30%以上.純化后, 蛋白純度達95%以上.ELISA結果表明所純化的蛋白可與抗DcR3抗體發生特異結合.結論: 誘騙受體DcR3基因的成功構建、表達及純化, 為進一步的功能研究奠定了基礎.

作 者： 李文珠 陶惠然 顏江華 張長弓 蘇金華 王階平 楊桂旺 莊國洪   作者單位： 李文珠,王階平,楊桂旺,莊國洪(廈門大學生命科學學院,福建,廈門,361005)

陶惠然,顏江華,張長弓,蘇金華(廈門大學醫學院抗癌研究中心,福建,廈門,361005) 

刊 名： 細胞與分子免疫學雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號： Q786  關鍵詞： DcR3   基因構建   基因表達  

【誘騙受體DcR3的基因構建、表達及特異性鑒定】相關文章：

維甲酸受體β基因RNAi表達質粒的構建及其對A549細胞增殖和分化的影響04-27

RS基因的植物表達載體和酵母表達載體構建04-27

Spl基因RNA干擾載體的構建及鑒定04-26

大鼠CD40基因RNA干擾真核表達載體的構建及鑒定04-26

大腸癌相關基因PGDH原核表達質粒的構建及表達04-26

T7RNAP基因的克隆及其質體定位表達載體的構建04-26

水稻GA受體的同源基因在玉米中的擴增04-27

幾丁質酶基因表達載體pET-chiB的構建及其在大腸桿菌中的誘導表達04-27

雞CD3γδ基因cDNA的克隆及其真核表達質粒的構建04-26

擬南芥PR-1基因啟動子的克隆與植物表達載體的構建04-27