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2種氣管黏膜上皮細胞體外培養技術的研究
目的 為以豬氣管黏膜上皮為細胞模型的研究奠定物質基礎,進一步探討豬氣管黏膜上皮細胞的體外傳統培養和氣液界面培養技術,從而使2種培養技術優勢互補.方法 對豬氣管上皮分離、純化、培養和傳代,并探索上皮細胞最佳凍存復蘇條件;復蘇后的氣管上皮細胞進行氣液界面培養,繪制細胞生長曲線和觀察細胞纖毛生發情況.利用免疫組化法鑒定上皮細胞.結果 4步純化法可以得到高純度的氣管上皮細胞.使用胎牛血清、DMEM/F12培養液和DMSO的體積分數為50%、40%和10%的凍存體系保存的氣管上皮,復蘇后細胞存活率平均可達89%.優化后的傳統方式培養的上皮細胞可連續傳代到第8代,但從第2代開始便觀察不到纖毛,轉換成氣液界面連續培養2代后重新生發纖毛,細胞存活期延長.免疫組化結果顯示分離培養細胞為上皮細胞.結論 成功建立了2種豬氣管上皮細胞培養技術,并找到適宜的氣管上皮細胞凍存條件,節省了不斷原代取材的成本和時間,并成功實現傳統培養細胞凍存復蘇后很快適應氣液界面的培養并恢復細胞的天然結構,為豬氣管黏膜上皮相關研究提供豐富的細胞來源.
張彥明,ZHANG Yan-ming(西北農林科技大學動醫學院,陜西,楊陵,712100)
魏建忠,李郁,王桂軍,WEI Jian-zhong,LI Yu,WANG Gui-jun(安徽農業大學,動物科技學院,安徽,合肥,230036)
何長生,王非,HE Chang-sheng,WANG Fei(安徽省動物疫病預防與控制中心,安徽,合肥,230000)
刊 名： 中國微生態學雜志 ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF MICROECOLOGY 年，卷(期)： 2010 22(2) 分類號： Q954.6-33~+2 關鍵詞： 豬氣管 上皮細胞 傳統培養 氣液界面培養 研究 Pig trachca-bronchia Epithelium Traditional culture Air-liquid culture Re-search【2種氣管黏膜上皮細胞體外培養技術的研究】相關文章：
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