外周血內皮祖細胞體外培養分化研究

目的從人外周血中分離、培養和鑒定內皮祖細胞(EPCs),并觀察其在體外增殖分化過程中各種細胞表型的變化.方法采用密度梯度離心方法獲得外周血單個核細胞,體外進行誘導、分化和擴增,于培養第7天選擇免疫熒光(DiI-acLDL/ FITC-UEA-Ⅰ)鑒定EPCs,并且用流式細胞儀和RT-PCR方法觀察上述細胞在第0、4、10和21天的CD34、CD31、KDR和eNOS的表達變化.結果外周血單個核細胞在培養過程中出現梭形貼壁和鋪路石樣等形態;第7天免疫熒光染色表明,約70%的細胞呈雙熒光陽性;流式細胞儀分析顯示,CD31和KDR表達在體外培養過程中逐漸升高,至第21天分別達到(72.1±11.2)%和(81.0±12.5)%,而CD34在第10天達到高峰(38.0±13.4)%后,第21天下降為(28.3%±12.2)%;RT-PCR結果表明,第4、10和21天eNOS的表達逐漸增強.結論本試驗成功從外周血單個核細胞中分離培養出EPCs,在其體外擴增分化為成熟內皮細胞的過程中,CD31、KDR和eNOS等內皮細胞標志表達逐漸增強,而CD34的表達在內皮祖細胞的成熟分化過程中略有下降.

作 者： 顧俊 王長謙 范華驊 聶曉絢 何奔 王彬堯 黃定九 GU Jun WANG Chang-qian FAN Hua-hua Nie Xiao-xuan HE Ben WANG Bin-yao Huang Ding-jiu   作者單位： 顧俊,王長謙,何奔,王彬堯,黃定九,GU Jun,WANG Chang-qian,HE Ben,WANG Bin-yao,Huang Ding-jiu(上海交通大學醫學院仁濟醫院心內科,上海,200001)

范華驊,聶曉絢,FAN Hua-hua,Nie Xiao-xuan(上海血液中心血液工程研究室) 

刊 名： 上海交通大學學報（醫學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q813.1 Q254  關鍵詞： 內皮祖細胞   內皮細胞   血管新生  

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