來源于E.coli和CHO表達(dá)系統(tǒng)的重組人β-NGF性質(zhì)比較

基于原核表達(dá)系統(tǒng)極難表達(dá)具有正確三級(jí)結(jié)構(gòu)的重組人β神經(jīng)生長(zhǎng)因子(rhNGF-β),E.coli是否能作為其工業(yè)化生產(chǎn)菌株存在爭(zhēng)議.為此,將構(gòu)建于E.coli體系,經(jīng)表達(dá)體外復(fù)性后的rhNGF-β與中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)表達(dá)體系分泌的rhNGF-β,運(yùn)用HPLC、SDS-PAGE、質(zhì)譜、N-末端分析等手段以及雞胚背根神經(jīng)節(jié)(DRG)、PC12細(xì)胞體外測(cè)活法對(duì)制備產(chǎn)物進(jìn)行分析、測(cè)定.結(jié)果表明:二者具有一致的理化性質(zhì)和生物學(xué)活性,HPLC純度均大于95%、生物學(xué)比活均不低于1.8 ng/U;經(jīng)添加賦型劑制成凍干粉后,在溫度37℃±2℃、相對(duì)濕度75%±5%條件下進(jìn)行3個(gè)月加速試驗(yàn),活性均不變.說明E.coli表達(dá)體系可生產(chǎn)質(zhì)量均一、高生物學(xué)活性的rhNGF-β,且具有明顯成本優(yōu)勢(shì).

作 者： 姜靜 姜桂香 JIANG Jing JIANG Gui-xiang   作者單位： 煙臺(tái)麥得津生物工程股份有限公司,煙臺(tái),264006  刊 名： 中國(guó)生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(2)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 重組人β神經(jīng)生長(zhǎng)因子   復(fù)性   表達(dá)   穩(wěn)定性  

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