無選擇標(biāo)記和載體骨干序列的Xa21轉(zhuǎn)基因水稻的獲得

利用雙右邊界T-DNA載體通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將水稻白葉枯病廣譜抗性基因Xa21導(dǎo)入雜交稻重要恢復(fù)系C418中.T0代共獲得27個(gè)獨(dú)立轉(zhuǎn)基因株系,通過田間抗性鑒定與PCR分析,有17個(gè)株系的Xa21基因分子鑒定為陽性,且對白葉枯病原菌P6生理小種具有抗性.通過對17個(gè)株系的后代植株進(jìn)行田間抗性鑒定,分子標(biāo)記輔助選擇及Southern雜交分析,結(jié)果顯示4個(gè)株系的T1代植株中能分離出無潮霉素標(biāo)記基因的Xa21轉(zhuǎn)基因植株.無選擇標(biāo)記Xa21轉(zhuǎn)基因株系的獲得率為15%.PCR檢測還表明,這些無選擇標(biāo)記的Xa21轉(zhuǎn)基因植株不帶有載體骨架序列.通過對轉(zhuǎn)基因后代進(jìn)一步的抗性鑒定與PCR輔助選擇,獲得了無選擇標(biāo)記和載體骨架序列的轉(zhuǎn)基因Xa21純合的抗白葉枯病水稻.

作 者： 夏志輝 李曉兵 陳彩艷 范海闊 江光懷 朱立煌 翟文學(xué) XIA Zhi-Hui LI Xiao-Bing CHEN Cai-Yan FAN Hai-Kuo JIANG Guang-Huai ZHU Li-Huang ZHAI Wen-Xue   作者單位： 中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所,北京,100101  刊 名： 生物工程學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號： Q789  關(guān)鍵詞： 轉(zhuǎn)基因水稻   Xa21   白葉枯病抗性   無選擇標(biāo)記   無載體骨干   雙右邊界T-DNA載體  

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