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嵌套多重PCR--研究田間植物部分叢枝菌根真菌和微生物區(qū)系的一個可行技術(shù)
對感染植物根部的叢枝菌根真菌進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定是菌根研究的基礎(chǔ),而僅僅通過形態(tài)學(xué)特征不可能將根內(nèi)菌根真菌鑒定到種.為了快速、準(zhǔn)確而又經(jīng)濟(jì)地鑒定植物根內(nèi)與根際的菌根真菌區(qū)系,本研究設(shè)計和應(yīng)用了嵌套多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù).本研究中,首先對所用PCR引物進(jìn)行了種特異性驗證和相容性分析.對4種孢子HAUO3,Glomus intraradices,Scutellospora castaneae和Glomus sp.HAUO4的研究結(jié)果表明,嵌套PCR具高度敏感性.在嵌套多重PCR的可行性研究中,應(yīng)用混合孢子樣品,于溫室條件下培養(yǎng)得到的4種菌根真菌共感染的紫云英根段,以及于田間采集得到的15種植物的根段.結(jié)果證明,嵌套多重PCR反應(yīng)同樣具有高度敏感性,準(zhǔn)確率達(dá)到95%.同時檢測到4種菌根真菌對植物的感染,證明了此實驗技術(shù)具高度敏感性、高效性,是菌根研究的一種新的簡易、經(jīng)濟(jì)而又切實可行的方法.
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