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5-氟尿苷生物轉化率的影響因素研究
目的:利用產氣腸桿菌EAM-Z1轉化合成5-氟尿苷(5-FUR),并對影響5-FUR轉化率的因素進行了考察.方法:以磷酸鹽緩沖液(PBS)為溶劑的5-FUR的轉化率為對照,考察反應溶劑Na2SO4溶液、中間體穩定劑、金屬離子、固定化細胞、粗酶液等因素對轉化率的影響.結果:以Na2SO4溶液為溶劑進行轉化,轉化率可提高10%左右;雙中間體穩定劑硼砂+硼酸使轉化率提高20%左右;Mg2+和Zn2+可提高產物的轉化率,在以PBS為溶劑的轉化反應中,1 mmol/L Mg2使轉化率提高了11.31%,以Na2SO4溶液為溶劑的轉化反應中,4 mmol/L Zn2+使轉化率提高了9.43%;以固定化細胞進行生物轉化,反應時間縮短為1 h,但轉化率略有降低;以粗酶液進行生物轉化,反應時間為4 h,轉化率提高21.29%.結論:5-FUR的轉化率受多種因素的影響,合理的反應溶劑如Na2SO4溶液、中間體穩定劑、金屬離子、提取酶粗提液等方法均可以較顯著的提高5-FUR的轉化率.
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