嗜酸乳桿菌推定的β-半乳糖苷酶基因在大腸桿菌中的功能性表達

目的 在大腸桿菌中誘導表達以嗜酸乳桿菌克隆β-半乳糖苷酶基因lacZ,為研究其酶學特性做準備.方法 從嗜酸乳桿菌ATCC 4356中克隆lacZ基因,并構建表達載體pET22b-lacZ-H、pQE31-H-lacZ和pQE31-lacZ,然后在大腸桿菌中誘導表達,并測定表達產物的β-半乳糖苷酶活性.結果 無標簽的重組嗜酸乳桿菌β-半乳糖苷酶LacZ獲得了功能性表達,表達量可達2.28 kU/L.而融合His-Tag的重組嗜酸乳桿菌LacZ卻失去了β-半乳糖苷酶活性,即使復性也不能恢復.結論 克隆表達的成功為該酶的酶學性質研究和可能的應用打下了基礎.

作 者： 潘渠 胡福泉 陳恬 邱岳 王廣科 李晉川 PAN Qu HU Fu-quan CHEN Tian QIU Yue WANG Guang-ke LI Jin-chuan   作者單位： 潘渠,PAN Qu(成都醫學院病原教研室,成都,610083;第三軍醫大學基礎部微生物學教研室,重慶,400038)

胡福泉,HU Fu-quan(第三軍醫大學基礎部微生物學教研室,重慶,400038)

陳恬,邱岳,王廣科,李晉川,CHEN Tian,QIU Yue,WANG Guang-ke,LI Jin-chuan(成都醫學院病原教研室,成都,610083) 

刊 名： 成都醫學院學報  英文刊名： JOURNAL OF CHENGDU MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2009 4(2)  分類號： Q786  關鍵詞： 嗜酸乳桿菌   β-半乳糖苷酶   克隆表達   His-Tag   復性  

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