應用紅外熒光和加尾引物法進行向日葵SSR遺傳分析中的多聚PCR和多聚凝膠電泳的優化

在向日葵(Helianthus annuus L.)自交系SSR遺傳分析中,為了提高SSR熒光分析效率、簡化分析程序和降低研究費用,我們進行了多聚PCR和多聚凝膠電泳兩項技術的優化研究.結果表明,優化多聚PCR和多聚凝膠電泳的影響因子(如逐步降低的退火溫度的循環數、各個多聚位點引物濃度的平衡、PCR緩沖液濃度以及Taq DNA多聚酶的濃度等)可以收到更好的實驗效果.基于以上的優化研究,系統地提出了一套優化的加尾引物法的策略.同時,提出了在多聚PCR和多聚凝膠電泳中常常遇到的技術難題的有效防止和解決的方法.

作 者： 張潞生 Vanessa BECQUET 李紹華 David ZHANG   作者單位： 張潞生(GEVES Le Magneraud, Laboratoire BioGEVES,B.P.52,F-17700 SURGERES,France;中國農業大學農學與生物技術學院,北京,100094)

Vanessa BECQUET,David ZHANG(GEVES Le Magneraud, Laboratoire BioGEVES,B.P.52,F-17700 SURGERES,France)

李紹華(中國科學院植物研究所,北京,100093) 

刊 名： 植物學報  ISTIC SCI 英文刊名： ACTA BOTANICA SINICA  年，卷(期)： 2003 45(11)  分類號： Q943  關鍵詞： 簡單重復序列(SSR)   加尾引物   多聚PCR   多聚凝膠電泳   向日葵   simple sequence repeat (SSR)   tailed primer   multiplex PCR   multiplex gel electrophoresis   sunflower  

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