TAT-PTD融合蛋白可能存在的跨膜遞送作用機制

為探討TAT-PTD融合蛋白的跨膜遞送作用機制,采用DNA重組技術構建pGEX-TAT-GFP表達質粒.在E.coli BL21表達GST-TAT-GFP,并用谷胱甘肽(glutathione)-Sepharose-4B親和柱進行純化.GST-TAT-GFP在不同條件下與細胞的作用結果表明,GST-TAT-GFP能有效進入HeLa、SMMC-7721、L-02和BEL-7402細胞,GST-TAT-GFP在遞送時對時間和濃度有依賴關系.同時,溫度對GST-TAT-GFP跨膜作用具有明顯的影響,GST-TAT-GFP的跨膜作用受代謝抑制劑的影響很小,肝素的存在能明顯抑制GST-TAT-GFP跨膜進入細胞的能力,GST-TAT-GFP對細胞活性沒有影響.這些結果說明,TAT-PTD可能是通過與細胞表面的硫酸乙酰肝素等受體相結合介導融合蛋白跨膜遞送進入細胞的.

作 者： 何火聰 劉樹滔 潘劍茹 傅蓉 陳菁 陳躬瑞 饒平凡 HE Huo-Cong LIU Shu-Tao PAN Jian-Ru FU Rong CHEN Jing CHEN Gong-Rui RAO Ping-Fan   作者單位： 何火聰,HE Huo-Cong(福州大學生物工程研究所,福州,350002;福建省腫瘤醫院放射生物學研究室,福州,350014)

劉樹滔,潘劍茹,傅蓉,陳菁,陳躬瑞,饒平凡,LIU Shu-Tao,PAN Jian-Ru,FU Rong,CHEN Jing,CHEN Gong-Rui,RAO Ping-Fan(福州大學生物工程研究所,福州,350002) 

刊 名： 中國生物化學與分子生物學報  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(9)  分類號： Q78  關鍵詞： TAT-PTD   跨膜遞送   GST-TAT-GFP  

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