大鼠骨髓間充質干細胞分離與培養條件的優化研究

目的:建立和優化大鼠骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分離培養條件,以獲得群體均一、未分化狀態保持良好的MSCs.方法:收集不同周齡大鼠骨髓細胞;以不同濃度Percoll密度梯度離心分離骨髓單個核細胞;以60%低糖DMEM40%MCDB201為基礎培養基,培養24h去懸浮細胞;以不同接種密度傳代培養;堿性磷酸酶染色和油紅O染色考察MSCs向骨和脂肪組織分化的潛能.結果:采用57%Percoll液的分離效果優于70%Percoll液.6周齡(體重約180g)大鼠能在細胞分離的質和量上達到最佳效果.24h進行懸浮細胞去除、5×103/cm2接種密度傳代培養,光鏡和電鏡顯示MSCs增殖能力強,功能狀態活躍,成脂成骨實驗顯示多向分化潛能保持良好.結論:優化大鼠周齡、分離液的密度、細胞培養條件及改進培養方法有助于獲得多向分化潛能保持良好的均一的MSCs.

作 者： 晏丹 舒賽男 YAN Dan SHU Sai-nan   作者單位： 晏丹,YAN Dan(武漢科技大學醫學院病理教研室,湖北,武漢,430065)

舒賽男,SHU Sai-nan(華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院兒科,湖北,武漢,430030) 

刊 名： 現代生物醫學進展  ISTIC 英文刊名： PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE  年，卷(期)： 2008 8(1)  分類號： Q813.1  關鍵詞： 間充質干細胞   分離   培養   優化  

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