晚期氧化蛋白產物的分離純化和鑒定

目的分離純化以人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)為原料生成的晚期氧化蛋白產物(advanced oxidation protein products,AOPP),即AOPP-HSA,并對其進行鑒定,以尋求一種制備高純度且具生物活性的AOPP-HSA的方法.方法采用HSA-HOCl孵育法體外制備AOPP-HSA粗純品,經凝膠層析和離子交換高壓液相層析(high performance liquid chromatography,HPLC)兩步層析分離純化其中的AOPP-HSA,并經紫外和熒光光譜、SDS-PAGE、單核細胞TNF-α分泌實驗鑒定其結構特征和生物學活性.結果分離的蛋白質純度達99.4%,分子質量為700×103,是含有雙酪氨酸的蛋白交聯聚合物,能夠顯著刺激單核細胞TNF-α的分泌.結論采用上述兩步層析方法能夠由粗純品中成功分離出高純度并具生物活性的AOPP-HSA,為AOPP的進一步研究奠定了基礎.

作 者： 孫巖 吳雄飛 金錫御 SUN Yan WU Xiong-fei JIN Xi-yu   作者單位： 第三軍醫大學西南醫院腎科,重慶,400038  刊 名： 第三軍醫大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2006 28(10)  分類號： Q503 Q51 Q591.2  關鍵詞： 晚期氧化蛋白產物   尿毒癥毒素   色譜法   凝膠   離子交換   單核細胞  

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