鈣網(wǎng)蛋白-N58在畢赤酵母中的表達(dá)及活性分析

目的:利用畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)Calreticulin-N58蛋白.方法:利用重疊延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,構(gòu)建成分泌型的重組表達(dá)載體pPIC9K-CRT-N58.該重組表達(dá)載體經(jīng)Sac I線性化后,電激轉(zhuǎn)化人畢赤酵母GS115,經(jīng)MD板和不同濃度G418篩選得到多拷貝重組菌株.經(jīng)甲醇誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白,SDS-PAGE分析重組蛋白的表達(dá)情況,在雞胚中進(jìn)行活性分析.結(jié)果:重組質(zhì)粒pPIC9K-CRT-N58在畢赤酵母中經(jīng)甲醇誘導(dǎo)能分泌表達(dá)CRT-N58蛋白,搖瓶表達(dá)量大約為60mg/L,純化的目的蛋白有顯著的血管生成抑制作用.結(jié)論:實(shí)驗(yàn)成功地在畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)中實(shí)現(xiàn)了Calreticulin-N58的分泌表達(dá).為Calreticulin-N58蛋白的進(jìn)一步藥用研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 周細(xì)南 蘇東曉 潘英文 張?zhí)碓?張愛聯(lián) ZHOU Xi-nan SU Dong-xiao PAN Ying-wen ZHANG Tian-yuan ZHANG Ai-lian   作者單位： 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物生物技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,海南海口,571101  刊 名： 生物技術(shù)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 18(3)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： calreticulin-N58   畢赤酵母   分泌表達(dá)   生物活性  

【鈣網(wǎng)蛋白-N58在畢赤酵母中的表達(dá)及活性分析】相關(guān)文章：

酵母菌的作用09-19

詩歌中的表達(dá)技巧教案09-25

軍訓(xùn)畢訓(xùn)總結(jié)09-24

赤竺丹花作文12-11

關(guān)于英雄的作文：赤，英雄02-20

蛋白質(zhì)04-07

赤那的忠誠令人敬佩作文07-10

《詩經(jīng)》中的棄婦詩及棄婦形象分析04-30

網(wǎng)癮學(xué)生心理案例分析報(bào)告（精選5篇）07-29

東晉仙道文學(xué)中的性別分析04-28