鈣網蛋白-N58在畢赤酵母中的表達及活性分析

目的:利用畢赤酵母表達系統表達Calreticulin-N58蛋白.方法:利用重疊延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,構建成分泌型的重組表達載體pPIC9K-CRT-N58.該重組表達載體經Sac I線性化后,電激轉化人畢赤酵母GS115,經MD板和不同濃度G418篩選得到多拷貝重組菌株.經甲醇誘導表達目的蛋白,SDS-PAGE分析重組蛋白的表達情況,在雞胚中進行活性分析.結果:重組質粒pPIC9K-CRT-N58在畢赤酵母中經甲醇誘導能分泌表達CRT-N58蛋白,搖瓶表達量大約為60mg/L,純化的目的蛋白有顯著的血管生成抑制作用.結論:實驗成功地在畢赤酵母表達系統中實現了Calreticulin-N58的分泌表達.為Calreticulin-N58蛋白的進一步藥用研究奠定了基礎.

作 者： 周細南 蘇東曉 潘英文 張添元 張愛聯 ZHOU Xi-nan SU Dong-xiao PAN Ying-wen ZHANG Tian-yuan ZHANG Ai-lian   作者單位： 中國熱帶農業科學院熱帶作物生物技術國家重點實驗室,海南海口,571101  刊 名： 生物技術  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 18(3)  分類號： Q786  關鍵詞： calreticulin-N58   畢赤酵母   分泌表達   生物活性  

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