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腺病毒介導的白介素10基因體外轉(zhuǎn)導大鼠β2m-/Thy-1+骨髓源性肝干

時間:2023-04-26 16:13:36 生物醫(yī)學論文 我要投稿
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腺病毒介導的白介素10基因體外轉(zhuǎn)導大鼠β2m-/Thy-1+骨髓源性肝干細胞

目的 研究腺病毒介導的白介素10(interleukin 10,IL-10)基因(AdlL-10)體外轉(zhuǎn)導β2m-/Thy-1+骨髓源性肝干細胞(bone marrow-derived liver stem cell,BDLSC)的可行性.方法 利用免疫磁珠細胞分選(magnetic bead cell sorting,MACS)方法分選大鼠β2m-/Thy-1+BDLSC,RT-PCR法鑒定其肝相關性表型的表達.AdIL-10轉(zhuǎn)導BDLSC,根據(jù)腺病毒攜帶的綠色熒光蛋白表達率測定轉(zhuǎn)導效率,采用RT-PCR法和ELISA法分別檢測IL-10的基因表達和蛋白分泌水平.采用MTT法和免疫熒光染色法分別檢測腺病毒轉(zhuǎn)導對BDLSC增殖能力和肝細胞樣表型白蛋白(albumin,ALB)表達的影響.結(jié)果 MASC法能成功分選純化BDLSC,其在基因水平表達肝細胞樣表型.AdIL-10轉(zhuǎn)導BDLSC的效率呈劑量依賴性,最佳轉(zhuǎn)染復數(shù)為500 pfu/eell.AdIL-10修飾BDLSC高表達IL10基因,且持續(xù)高濃度分泌IL-10蛋白至胞外.AdIL-10轉(zhuǎn)導72 h后,BDLSC仍保持正常的增殖能力和ALB表達.結(jié)論 BDLSC是AdIL-10轉(zhuǎn)導的適宜載體,為AdIL-10修飾BDLSC這一新型結(jié)合方式用于慢性肝病的治療奠定了實踐基礎.

作 者: 蘭玲 陳源文 孫超 孫巧玲 李定國 LAN Ling CHEN Yuanwen SUN Chao SUN Qiaoling LI Dingguo   作者單位: 上海交通大學醫(yī)學院,新華醫(yī)院消化內(nèi)科,上海,200092  刊 名: 胃腸病學和肝病學雜志  ISTIC 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY  年,卷(期): 2008 17(1)  分類號: Q813 Q7.82  關鍵詞: 骨髓源性肝干細胞   腺病毒載體   白介素10   基因轉(zhuǎn)導  

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