TBa過敏原表位區(qū)段的融合表達(dá)及免疫活性分析

為了確定苦蕎過敏原TBa(tartary buckwheat allergen)的抗原表位及進(jìn)一步了解蕎麥過敏反應(yīng)機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)以苦蕎過敏原TBa cDNA序列為模板,設(shè)計(jì)引物,克隆苦蕎過敏原TBa表位區(qū)段基因,分別構(gòu)建TBa及兩個(gè)表位區(qū)段原核表達(dá)載體,在大腸桿菌BL21(DE3)中進(jìn)行表達(dá)并純化,采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA對(duì)其免疫活性進(jìn)行分析與比較.SDS-PAGE及Western Blot鑒定和檢測(cè)結(jié)果表明,目的蛋白在E.coli BL21(DE3)中可高效表達(dá),其N端帶有6個(gè)組氨酸標(biāo)簽.Ni2+-NTA瓊脂糖柱親和純化得到了純度較高的目的片段.ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,表達(dá)產(chǎn)物與蕎麥?zhǔn)称愤^敏病人血清中的IgE具有特異的結(jié)合活性.本研究為揭示苦蕎過敏蛋白結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系奠定了基礎(chǔ).

作 者： 蔡桂紅 李玉英 張政 王轉(zhuǎn)花 CAI Gui-hong LI Yu-ying ZHANG Zheng WANG Zhuan-hua   作者單位： 化學(xué)生物學(xué)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山西大學(xué)生物技術(shù)研究所,山西,太原,030006  刊 名： 食品科學(xué)  ISTIC PKU 英文刊名： FOOD SCIENCE  年，卷(期)： 2006 27(11)  分類號(hào)： Q78 R392  關(guān)鍵詞： 苦蕎麥過敏原   表位   融合表達(dá)   免疫活性  

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