微柱液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜檢測多磷酸化肽位點(diǎn)

基于堿性磷酸酶的去磷酸化作用,發(fā)展了一種可改善多磷酸化肽電噴霧質(zhì)譜檢測效果的技術(shù).將β-酪蛋白酶解產(chǎn)物用TiO2柱富集后,用堿性磷酸酶進(jìn)行處理,并經(jīng)微柱液相色譜分離后采用串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行鑒定.通過譜圖中存在相對(duì)分子質(zhì)量與根據(jù)氨基酸序列預(yù)計(jì)的單磷酸化肽相差80的色譜峰,可以證實(shí)樣品中含有單磷酸化肽.此外,經(jīng)堿性磷酸酶處理后的樣品的色譜峰數(shù)目的增加,說明樣品中可能存在多磷酸化肽段.通過控制去磷酸化反應(yīng)的程度,使四磷酸化肽的部分磷酸基團(tuán)被去除,從而可以推斷其中3個(gè)磷酸化位點(diǎn)可能處于氨基酸殘基序列的第17、18和19位.

作 者： 王暉 段繼誠 袁輝明 張麗華 張維冰 張玉奎 WANG Hui DUAN Jicheng YUAN Huiming ZHANG Lihua ZHANG Weibing ZHANG Yukui   作者單位： 王暉,段繼誠,袁輝明,WANG Hui,DUAN Jicheng,YUAN Huiming(中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所,國家色譜研究分析中心,遼寧,大連,116023;中國科學(xué)院研究生院,北京,100039)

張麗華,張維冰,張玉奎,ZHANG Lihua,ZHANG Weibing,ZHANG Yukui(中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所,國家色譜研究分析中心,遼寧,大連,116023) 

刊 名： 色譜  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY  年，卷(期)： 2007 25(4)  分類號(hào)： O658  關(guān)鍵詞： 微柱液相色譜   電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜   多磷酸化肽   磷酸化位點(diǎn)   堿性磷酸酶  

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