微柱液相色譜-電噴霧串聯質譜檢測多磷酸化肽位點

基于堿性磷酸酶的去磷酸化作用,發展了一種可改善多磷酸化肽電噴霧質譜檢測效果的技術.將β-酪蛋白酶解產物用TiO2柱富集后,用堿性磷酸酶進行處理,并經微柱液相色譜分離后采用串聯質譜進行鑒定.通過譜圖中存在相對分子質量與根據氨基酸序列預計的單磷酸化肽相差80的色譜峰,可以證實樣品中含有單磷酸化肽.此外,經堿性磷酸酶處理后的樣品的色譜峰數目的增加,說明樣品中可能存在多磷酸化肽段.通過控制去磷酸化反應的程度,使四磷酸化肽的部分磷酸基團被去除,從而可以推斷其中3個磷酸化位點可能處于氨基酸殘基序列的第17、18和19位.

作 者： 王暉 段繼誠 袁輝明 張麗華 張維冰 張玉奎 WANG Hui DUAN Jicheng YUAN Huiming ZHANG Lihua ZHANG Weibing ZHANG Yukui   作者單位： 王暉,段繼誠,袁輝明,WANG Hui,DUAN Jicheng,YUAN Huiming(中國科學院大連化學物理研究所,國家色譜研究分析中心,遼寧,大連,116023;中國科學院研究生院,北京,100039)

張麗華,張維冰,張玉奎,ZHANG Lihua,ZHANG Weibing,ZHANG Yukui(中國科學院大連化學物理研究所,國家色譜研究分析中心,遼寧,大連,116023) 

刊 名： 色譜  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY  年，卷(期)： 2007 25(4)  分類號： O658  關鍵詞： 微柱液相色譜   電噴霧串聯質譜   多磷酸化肽   磷酸化位點   堿性磷酸酶  

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