- 相關推薦
用小雙鏈RNA抑制轉化入HUVEC中綠色熒光蛋白基因的表達
目的:建立穩定表達綠色熒光蛋白(GFP)的人臍靜脈血管內皮細胞(HUVECs),研究小干擾RNA(siR-NA)對HUVECs中GFP表達的抑制作用.方法:用lipofectamine2000將編碼GFP的質粒pN3-EGFP轉入HUVECs中.用G418篩選并維持已轉化pN3-EGFP的HUVEC(HUVEC-GFP).利用T7RNA轉錄試劑盒,制備可抑制GFP基因表達的siRNA(GFPsiRNA)和無關對照的RNA(control siRNA).用oligofectamine將siRNA轉入HUVEC-GFP中.繼續培養48 h后,檢測HUVEC-GFP中GFP蛋白和mRNA表達水平.結果:用G418篩選獲得了HUVEC-GFP細胞株,可以觀察到GFP的穩定表達.HUVEC-GFP轉化siRNA后48 h,GFP的熒光強度明顯下降,而對照組的熒光強度無明顯下降.半定量RT-PCR檢測顯示,GFPsiRNA對GFP mRNA表達有較強的抑制作用,抑制率達40%,而control siRNA對GFPmuRNA表達水平無明顯的抑制作用.結論:利用體外轉錄合成的siRNA能有效地抑制HUVECs中GFP的表達.
作 者： 單志新 林秋雄 余細勇 鄧春玉 鄭猛 譚虹虹 符永恒 楊敏 林曙光 SHAN Zhi-xin LIN Qiu-xiong YU Xi-yong DENG Chun-yu ZHENG Meng TAN Hong-hong FU Yong-heng YANG Min LIN Shu-guang 作者單位： 廣東省人民醫院醫學研究中心,廣東,廣州,510080 刊 名： 中國病理生理雜志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(2) 分類號： Q78 關鍵詞： RNA干擾 綠色熒光蛋白 人臍靜脈血管內皮細胞 脂質體【用小雙鏈RNA抑制轉化入HUVEC中綠色熒光蛋白基因的表達】相關文章：
《基因指導蛋白質的合成》教案04-24
《綠色蟈蟈》教案(轉王家心教案)04-25
熒光筆作文04-21
中交綠色發展口號01-19
我是綠色小衛士作文【經典】01-12
我是綠色小衛士作文07-11
我是綠色小衛士作文09-30
交換機網絡中的冗余鏈路技術03-14
血凝抑制實驗報告09-04
詩歌中的表達技巧教案09-25