洋蔥伯克霍爾德氏菌L68鄰苯二酚2,3-雙加氧酶基因克隆、表達和純化

采用自行設計的引物,從洋蔥伯克霍爾德氏菌L68中PCR擴增得到phnE(鄰苯二酚2,3-雙加氧酶)基因,亞克隆到高表達載體pET 32a上,轉入表達菌株中.經(jīng)雙向測序,證實構建過程中未出現(xiàn)突變.重組子經(jīng)IPTG誘導后,可以表達有活性的重組雙加氧酶.選擇26 ℃進行重組蛋白誘導.薄層掃描顯示,表達重組蛋白總量最高可占總蛋白的64.92%.利用金屬螯合層析對重組蛋白進行了一步純化,SDS-PAGE結果顯示,重組蛋白純度達到95%.

作 者： 呂鵬 劉大桅 張長鎧 LUI Peng LIU Dawei ZHANG Chang-kai   作者單位： 山東大學,微生物技術國家重點實驗室,山東,濟南,250100  刊 名： 食品與生物技術學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 25(3)  分類號： Q93  關鍵詞： 洋蔥伯克霍爾德氏菌   鄰苯二酚2,3-雙加氧酶   克隆表達   金屬螯合層析  

【洋蔥伯克霍爾德氏菌L68鄰苯二酚2,3-雙加氧酶基因克隆、表達和純化】相關文章：

少動鞘氨醇單胞菌ZX4兒茶酚2,3-雙加氧酶基因的克隆與表達04-25

重組幽門螺桿菌AhpC基因的克隆表達及其初步純化04-26

乳鏈菌肽前體基因（nisZ）在乳酸乳球菌中的克隆和表達04-26

雙加氧酶α亞基保守序列克隆及探針制備04-27

嗜肺軍團菌lvgA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達04-26

大腸桿菌RNaseⅢ基因的克隆與表達04-26

甲醇利用菌SDM11中glyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達04-26

基因重組BDNF蛋白在大腸桿菌中的表達純化與功能鑒定04-26

人類心臟特異表達基因pygol的克隆與功能研究04-26

人溶菌酶基因cDNA的克隆和序列分析04-26