奶山羊細菌人工染色體基因文庫構建的初步研究

細菌人工染色體(BAC)文庫是進行動物基因組學研究的一個重要手段,為配合山羊乳腺生物反應器的研究,對構建山羊基因組BAC文庫進行了初步研究.用HindⅢ酶對莎能奶山羊基因組進行部分酶切,用CHEF (箝位勻強電場)二次電泳法回收150 kb大小條帶,電透析回收高分子量(HMW) DNA;同時以BAC載體pBeloBAC11為材料,分別采用限制性內切酶HindⅢ和HK脫磷酶對其進行酶切和脫磷,將該載體自連并通過凝膠回收線性段DNA,獲得了可用于構建BAC文庫的線性載體.將HMW與載體進行連接,電擊轉化感受態DH10β大腸桿菌,一次轉化得到近2000個克隆.插入片段大小為50～200 kb,基本滿足建庫的需要.

作 者： 鞠輝明 張信軍 李貴陽 劉宗平 成勇 JU Hui-ming ZHANG Xin-jun LI Gui-yang LIU Zong-ping CHENG Yong   作者單位： 揚州大學,獸醫學院,江蘇,揚州,225009  刊 名： 揚州大學學報（農業與生命科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 27(3)  分類號： Q786 S852.61  關鍵詞： 山羊   細菌人工染色體   文庫構建  

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