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SHV-12型超廣譜β-內(nèi)酰胺酶特性的研究
目的研究SHV-12型超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBL)的特性.方法將blaSHV-12基因連接至pET28a載體上,并用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21進行克隆表達,挑選blaSHV-12陽性表達的菌落,提取其酶蛋白進行等電點測定和酶動力學(xué)分析.結(jié)果SHV-12型ESBL等電點為8.2.同時,在所測的幾種抗生素中,該酶對頭孢他啶和頭孢噻肟的Km相同且最小;對頭孢噻吩,有著最大的Vmax/Km;而對阿莫西林,表現(xiàn)出最大的Km和最低的Vmax.結(jié)論SHV-12型ESBL對頭孢他啶和頭孢噻肟具有高的親和力,而對頭孢噻吩有最大的催化效能.
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