兩種泥鰍芳香化酶基因的克隆與時空表達

魚類的性別分化易受發育環境的影響.向性成熟的泥鰍和大鱗副泥鰍個體注射絨毛膜促性腺激素,獲得卵子和精子進行人工授精.把胚胎分別置于20℃、25℃和30℃條件下,使其發育.經性腺檢查發現隨著溫度的升高兩種泥鰍中雄性個體所占的比例明顯升高,獲得明顯的偏雄比率群體.根據已知細胞色素P450芳香化酶CYP19b基因序列設計嵌套簡并引物用巢式PCR擴增并克隆出了兩種泥鰍的CYP19b的DNA片段.MaCYP19b片段和PdCYP19b片段分別長1337bp和1473bp.在此基礎上用各自的特異引物克隆出兩種泥鰍CYP19b的相應cDNA片段.通過基因組DNA和cDNA序列的比較證明兩種泥鰍的CYP19b基因均包含三個內含子和四個外顯子,編碼的蛋白質序列長145氨基酸殘基.以GAPDH基因為對照,分別對兩種泥鰍成體組織和不同發育階段的胚胎的CYP19b進行了半定量RT-PCR表達分析,結果表明泥鰍CYP19b基因只在成體泥鰍卵巢、腎以及原腸胚和神經胚中表達.大鱗副泥鰍CYP19b基因在成體的腦、卵巢和腎以及神經胚和卵黃吸收期表達.這些結果為揭示細胞色素P450芳香化酶基因與環境性別決定機制的關系奠定了基礎.

作 者： 杜啟艷 南平 燕帥國 常重杰 DU Qi-Yan NAN Ping YAN Shuai-Guo CHANG Zhong-Jie   作者單位： 河南師范大學生命科學學院,新鄉,453007  刊 名： 水生生物學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 30(3)  分類號： Q343  關鍵詞： 泥鰍   大鱗副泥鰍   細胞色素P450芳香化酶   性別分化  

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