通用型奶牛多位點基因打靶載體系統的構建

以奶牛為研究對象,以其重復的rRNA基因間的間隔序列為靶位點,基于BAC重組酶系統構建多位點基因打靶載體,為建立體內多位點基因打靶技術獲得關鍵材料.首先構建BAC-TDN篩選載體,然后構建pYLVS-GD表達載體.將BAC-TDN篩選載體和pYLVS-GD表達載體共轉化至大腸桿菌NS3529中,通過Cre重組酶的作用形成BAC-TDN-VS-GD質粒,采用歸位內切酶I-Sce Ⅰ切除pYLVS載體骨架,構建奶牛多位點基因打靶載體BAC-TDN-GD,利用接頭LS使之環化.BAC-TDN-GD打靶載體與pYLSV質粒組成了通用型奶牛多位點打靶載體系統.以重復序列為靶位點的多位點基因打靶技術,將部分解決目前存在的打靶效率低、安全性差等問題.

作 者： 蔣泓 唐冬生 李月琴 張欣 李芳 胥斯卡 周天鴻 JIANG Hong TANG Dong-sheng LI Yue-qin ZHANG Xin LI Fang XU Si-ka ZHOU Tian-hong   作者單位： 蔣泓,李月琴,張欣,胥斯卡,周天鴻,JIANG Hong,LI Yue-qin,ZHANG Xin,XU Si-ka,ZHOU Tian-hong(暨南大學生物工程學系,廣東,廣州,510632)

唐冬生,TANG Dong-sheng(暨南大學生物工程學系,廣東,廣州,510632;佛山科學技術學院醫學院,廣東,佛山,528000)

李芳,LI Fang(佛山科學技術學院醫學院,廣東,佛山,528000) 

刊 名： 暨南大學學報（自然科學與醫學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION）  年，卷(期)： 2006 27(3)  分類號： Q782  關鍵詞： 基因打靶   多位點   細菌人工染色體   重組酶系統   奶牛   重復序列  

【通用型奶牛多位點基因打靶載體系統的構建】相關文章：

RS基因的植物表達載體和酵母表達載體構建04-27

Spl基因RNA干擾載體的構建及鑒定04-26

抑制低氧誘導因子活性的轉錄載體pTZU6+1RNAi系統的構建04-26

牛肉風味強化肽(BMP)表達載體的構建04-26

FUS1基因慢病毒載體的構建04-26

擬南芥中離子轉運蛋白載體構建及煙草轉化04-27

基于XcmⅠ酶切的高效TA克隆載體的構建04-27

攜帶人TGF-β1腺病毒載體的構建及鑒定04-26

NtSKP1基因的反義載體構建及轉基因煙草的產生04-26

人類α-actin 啟動子真核表達載體的構建及應用04-26