應(yīng)用T/A策略克隆乙肝病毒pC/C及C基因

以克隆乙型肝炎病毒pC/C及C基因為例,報道了在DNA重組中,當目的基因與載體末端不匹配時可采取的一新方法.用內(nèi)切酶切取的基因片段為平端時,可在含dATP的反應(yīng)體系中,用Taq酶的末端轉(zhuǎn)移酶活性在其3'末端加上單個堿基(dA)的突出尾;基因片段為3'凹端時,可在含4種dNTP的體系中,利用Taq酶的聚合酶活性先將其末端補平,再經(jīng)末端轉(zhuǎn)移酶活性在其3'末端加dA尾;末端經(jīng)此修飾的基因片段可亞克隆至T載體中,再克隆于其他表達載體中.

作 者： 劉定燮 駱抗先 LIU Ding-Xie LUO Kan-Xian   作者單位： 第一軍醫(yī)大學南方醫(yī)院感染內(nèi)科實驗室,廣州,510515  刊 名： 生物化學與生物物理進展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(6)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： DNA重組   T載體   Taq DNA聚合酶   乙型肝炎病毒  

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