胸腺素α原基因的克隆及在大腸桿菌中的融合表達

胸腺素α原(ProTα)作為一種免疫增強劑,對各種免疫缺陷疾病、病毒感染以及腫瘤都具有一定的作用.此外ProTα可以作為核蛋白參與細胞增殖,在腫瘤的預測、診斷及治療中有一定應用.根據人胸腺素α原已發表的核苷酸序列,設計了一對特異性引物(P1/P2),應用RT-PCR法從中國人外周血中克隆到ProTα基因,將擴增產物連接到pMD18-T載體中并轉化大腸桿菌DH5α,篩選陽性重組質粒進行序列測定;同時用EcoRI和BamHI雙酶切PCR產物,將該基因片斷插入經同樣雙酶切的質粒pGEX 6P-1中,轉化大腸桿菌BL21中進行表達.結果表明,克隆到的ProTα基因與參考的氨基酸同源性為99.70%;原核表達產物經過SDS-PAGE電泳分析,融合蛋白分子量為37 ku,主要以可溶形式存在.

作 者： 李俊燕 周克夫 LI Jun-yan ZHOU Ke-fu   作者單位： 廈門大學生命科學學院,細胞生物學與腫瘤細胞工程教育部重點實驗室,福建,廈門,361005  刊 名： 廈門大學學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 45(5)  分類號： Q786  關鍵詞： 胸腺素α原   克隆   融合表達  

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