轉(zhuǎn)基因白樺外源基因的多重PCR快速檢測

根據(jù)轉(zhuǎn)化的載體序列上T-DNA中的目的基因bt,選擇性篩選標(biāo)記基因nptⅡ和報告基因gus設(shè)計三對特異性引物,PCR產(chǎn)物片斷大小分別為247 bp、449 bp、668 bp,應(yīng)用多重PCR (mutiplex-PCR)的方法同步檢測18株轉(zhuǎn)基因白樺中三個基因的整合狀況;用陽性對照為模板,對單重PCR(simplex-PCR)和多重PCR的各項指標(biāo)進行比較.結(jié)果表明多重PCR檢測多個外源基因在敏感性方面與單重PCR相比并沒有減弱,而且略有提高;對18株樣品的多重PCR同步檢測無假陽性出現(xiàn),結(jié)果準(zhǔn)確,同時在操作中具有減少污染,縮短時間和節(jié)約成本等優(yōu)點.因此,在對轉(zhuǎn)基因白樺的外源基因的定期檢測中,多重PCR是一種非常有效而便捷的方法,可以為轉(zhuǎn)基因的拷貝數(shù),T-DNA旁側(cè)序列特征等轉(zhuǎn)基因整合特性方面的研究提供數(shù)據(jù).

作 者： 詹亞光 蘇濤 韓梅 孫冬 ZHAN Ya-Guang SU Tao HAN Mei SUN Dong   作者單位： 詹亞光,蘇濤,孫冬,ZHAN Ya-Guang,SU Tao,SUN Dong(東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,哈爾濱,150040)

韓梅,HAN Mei(東北林業(yè)大學(xué)森林植物生態(tài)學(xué)教育部重點實驗室,哈爾濱,150040) 

刊 名： 植物研究  ISTIC PKU 英文刊名： BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH  年，卷(期)： 2006 26(4)  分類號： Q94  關(guān)鍵詞： 白樺   外源基因   T-DNA   多重PCR  

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