水稻精細胞cDNA文庫的構建及分析

利用Percoll密度梯度離心和多次濾膜過濾分離到適于分子生物學研究的水稻(Oryza sativa L.cv.Guichao 2)生活精細胞.借助RT-PCR和SMART技術構建了水稻精細胞的cDNA文庫.初級文庫的大小為1.58×106pfu,插入片段平均大小為980bp.103個隨機挑選的克隆與DIG標記的水稻幼苗根、葉及二細胞時期花粉、成熟花粉、精細胞和授粉5～7 d的子房cDNA探針雜交表明,除少數克隆外,它們在上述器官中的表達情況很相似.10個隨機挑選的克隆用來測序及分析,有4個克隆含有完整的開放閱讀框.1個克隆與水稻Polyubiquitin(Rubql)mRNA高度同源.Northern雜交表明它在二細胞時期花粉、成熟花粉中的表達顯著少于在根、葉和授粉子房中的表達.另一個克隆的開放閱讀框編碼與擬南芥(Arabidopsis thaliana(L.)Heynh.)AtRAD17同源的蛋白.這是第一次正式報道高等植物精細胞cDNA文庫的構建,也是第一次從高等植物精細胞中分離到其表達的基因.

作 者： 茍小平 徐鶯 唐琳 顏鈁 陳放   作者單位： 四川大學生命科學學院,  刊 名： 植物學報  ISTIC SCI 英文刊名： ACTA BOTANICA SINICA  年，卷(期)： 2001 43(10)  分類號： Q943.2  關鍵詞： cDNA文庫   精細胞   Rubql   AtRAD17   水稻  

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