喙尾琵甲DNA提取方法比較與AFLP反應體系的建立

采用CTAB法、改進SDS-蛋白酶K法、SDS-飽和氯化鈉法和提取試劑盒對喙尾琵甲的肌肉、蟲卵和幼蟲進行DNA提取,比較了DNA的提取和保存質量,并對AFLP試驗的酶切時間、預擴增產物稀釋倍數和選擇性擴增引物量等關鍵因子進行試驗和優化.結果表明:4種方法對肌肉組織提取的DNA質量都較好;3種傳統方法提取的DNA的保存時間長于試劑盒提取的DNA;使用EcoR Ⅰ/Mse Ⅰ內切酶組合,10 U EcoR Ⅰ和2 U Mse Ⅰ分兩步各酶切2 h,T4連接酶3 h連接后,以20倍稀釋的預擴增產物和5 ng/35 ng的E+3/M+3引物量進行選擇性擴增,建立了喙尾琵甲AFLP分子標記體系.

作 者： 趙敏 馮穎 和銳 陳曉鳴 冀煥紅 ZHAO Min FENG Ying HE Rui CHEN Xiao-ming JI Huan-hong   作者單位： 中國林業科學研究院資源昆蟲研究所,國家林業局資源昆蟲培育與利用重點實驗室,云南,昆明,650224  刊 名： 林業科學研究  ISTIC PKU 英文刊名： FOREST RESEARCH  年，卷(期)： 2010 23(2)  分類號： Q963  關鍵詞： 喙尾琵甲   基因組DNA   DNA提取   AFLP   Blaps rhynchopetera   genomic DNA   DNA extraction   AFLP  

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