利用FLP/frt重組系統產生無選擇標記的轉基因煙草植株

在植物轉基因植株產生過程中,對轉化細胞進行抗性篩選是通用程序,轉化細胞的抗性一般是抗生素抗性或除草劑抗性,將賦予轉化細胞抗性的選擇標記基因刪除是提高轉基因植物生物安全性的重要措施.來自于啤酒酵母的FLP/frt位點特異性重組系統可有效刪除同向定點重組位點frt之間的基因.通過多步驟重組,建立了可在植物中廣泛應用的FLP/frt位點特異性重組系統.該系統包括含有frt位點的植物表達載體pCAMBIA1300-betA-frt-als-frt和含有由熱誘導啟動子hsp啟動的FLP重組酶基因的植物表達載體pCAMBIA1300-hsp-FLP-hpt.利用二次轉化的方式將二者先后轉入煙草植株,熱激處理后,熱誘導型啟動子hsp調控的重組酶FLP基因的表達催化位于選擇標記基因als兩側同向frt位點間的重組反應,有效地刪除了選擇標記基因als.41%的經熱激處理的二次轉化植株發生了選擇標記基因的刪除,表明該系統在獲得無選擇標記基因的轉基因植株中有很好的應用價值.

作 者： 單曉昳 李蓓 張舉仁 SHAN Xiao-Yi LI Bei ZHANG Ju-Ren   作者單位： 山東大學生命科學學院,濟南,250100  刊 名： 生物工程學報  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(5)  分類號： Q785  關鍵詞： 選擇標記基因   FLP/frt   位點特異性重組系統   hsp熱誘導啟動子  

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