內(nèi)引物在環(huán)媒恒溫基因擴(kuò)增技術(shù)中的作用研究

目的 研究?jī)?nèi)引物在環(huán)媒恒溫基因擴(kuò)增(LAMP)中的作用,確定利用LAMP的同一套特異性引物區(qū)別具有單核苷酸差異的不同株型或同一株型的病原菌基因的可行性. 方法 采用PCR介導(dǎo)定點(diǎn)突變法對(duì)沙門(mén)氏菌invA基因定點(diǎn)突變,使其T669→A669、T725→A725,用原LAMP特異性引物擴(kuò)增含單核苷酸差異序列,觀察擴(kuò)增結(jié)果. 結(jié)果 制備的點(diǎn)突變模板C大小與預(yù)期值(1 371 bp)一致.LAMP擴(kuò)增的傷寒沙門(mén)氏菌CMCC50098標(biāo)準(zhǔn)株DNA產(chǎn)物的電泳條帶呈梯狀,而擴(kuò)增模板C未擴(kuò)出反應(yīng)產(chǎn)物. 結(jié)論 LAMP不能利用同一套引物擴(kuò)增具有單核苷酸差異的不同株型或同一株型的病原菌,即可利用同一套引物區(qū)分這些病原菌.

作 者： 劉洵 程天印 王曉君 LIU Xun CHENG Tian-yin WANG Xiao-jun   作者單位： 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,湖南長(zhǎng)沙,410128  刊 名： 中國(guó)病原生物學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY  年，卷(期)： 2008 3(4)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： 環(huán)媒恒溫基因擴(kuò)增   內(nèi)引物   基因突變  

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