奶山羊β-乳球蛋白基因5、3調(diào)控區(qū)的克隆和序列分析

目的:克隆奶山羊β-乳球蛋白(BLG)基因5'、3'調(diào)控區(qū),并對其進行序列分析.方法:從徐淮奶山羊組織中提取基因組DNA,采用高保真長模板PCR法克隆得到奶山羊BLG基因4.2 kb的5'調(diào)控區(qū)和1.8 kb的3'調(diào)控區(qū);將純化后的PCR產(chǎn)物克隆到pGEM-T Easy載體中,經(jīng)酶切鑒定和序列測定驗證克隆的正確性.結(jié)果:部分序列分析表明,奶山羊BLG基因5'區(qū)與GenBank中登錄的山羊和綿羊BLG基因5'區(qū)的同源性分別為100%和95%,3'區(qū)的同源性分別為99%和93%;克隆得到的奶山羊BLG基因調(diào)控區(qū)與山羊BLG偽基因顯著不同,二者5'區(qū)和3'區(qū)的同源性分別為83%和88%.結(jié)論:克隆得到的奶山羊BLG基因調(diào)控區(qū)可用于構(gòu)建乳腺特異性表達載體,用于外源基因在轉(zhuǎn)基因動物乳腺中的高效表達.

作 者： 周詠松 成勇 殷烈 徐冬蘭 柏亞軍 郭磊 袁玉國 ZHOU Yong-Song CHENG Yong YIN Lie XU Dong-Lan BAI Ya-Jun GUO Lei YUAN Yu-Guo   作者單位： 揚州大學,獸醫(yī)學院,江蘇省轉(zhuǎn)基因動物制藥工程研究中心,江蘇,揚州,225009  刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(4)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 奶山羊   β-乳球蛋白   基因克隆   DNA序列分析  

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