敬釗毒素-V剪切體Y1-JZTX-V的化學合成與氧化復性及其鈉通道活性鑒定

應用芴甲氧羰基(Fmoc)固相方法化學合成了敬釗毒素-V(JZTX-V)分子N-端酪氨酸殘基剪切體(Y1-JZTX-V),并且通過反相高效液相色譜和質譜對不同條件下的氧化復性結果進行監(jiān)測,從而得到該剪切體的最佳氧化復性條件:0.1 mol/L Tris-HCl緩沖液、pH 7.50、1 mmol/L還原型谷胱甘肽(GSH)、0.1 mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSG)、樣品濃度為0.05 mg/L、復性溫度為4 ℃.膜片鉗電生理實驗結果顯示敬釗毒素-V剪切體Y1-JZTX-V對大鼠背根神經節(jié)(DRG)細胞上表達的河豚毒素不敏感型(TTX-R)與河豚毒素敏感型(TTX-S)鈉電流均有抑制作用,其半數抑制濃度(IC50)分別為(160±2.5)nmol/L和(39.6±3.2)nmol/L.與天然的敬釗毒素-V相比,該剪切體對大鼠DRG細胞上的TTX-S鈉電流的抑制作用基本一致,但對TTX-R鈉電流的抑制作用卻大大降低,表明敬釗毒素-V分子N-端的酪氨酸殘基是一個與TTX-R鈉通道結合活性相關的氨基酸殘基.

作 者： 全妙華 曾雄智 皮建輝 鄧梅春 梁宋平 QUAN Miaohua ZENG Xiongzhi PI Jianhui DENG Meichun LIANG Songping   作者單位： 全妙華,皮建輝,QUAN Miaohua,PI Jianhui(湖南師范大學,蛋白質化學與發(fā)育生物學教育部重點實驗室,湖南,長沙,410081;懷化學院生物工程系,湖南,懷化,418008)

曾雄智,鄧梅春,梁宋平,ZENG Xiongzhi,DENG Meichun,LIANG Songping(湖南師范大學,蛋白質化學與發(fā)育生物學教育部重點實驗室,湖南,長沙,410081) 

刊 名： 色譜  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY  年，卷(期)： 2007 25(4)  分類號： O658  關鍵詞： 化學合成   敬釗毒素-V剪切體   復性   鈉離子通道  

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