NOD1真核表達質粒的構建及表達

目的:構建天然免疫胞內識別受體核苷酸寡聚域1(NOD1)真核表達質粒.方法:MOD1基因片段經PCR擴增獲得,經酶切后連接到真核表達載體pcDNA3/flag中,對挑選出的陽性克隆測序,將序列正確的重組質粒pflagNOD1轉染293T細胞,用Western印跡檢測目的蛋白的表達,同時用NF-KB的螢光素酶報告基因檢測NOD1蛋白的活性.結果:pflag-NOD1可以在真核細胞293T中表達,并可以增強NF-κB報告基因的轉錄活性.結論:構建了重組質粒pflag-NOD1,在細胞中表達NOD1后能夠提高NF-KB轉錄的生物活性,為進一步研究NOD1的功能奠定了基礎.

作 者： 陳宣男 何湘 姜錚 王雪松 劉大偉 郭燕紅 袁靜 甄清 CHEN Xuan-Nan HE Xiang JIANG Zheng WANG Xue-Song LIU Da-Wei GUO Yan-Hong Yuan Jing ZHEN Qing   作者單位： 陳宣男,CHEN Xuan-Nan(吉林大學,公共衛生學院,吉林,長春,130021;中國人民解放軍,疾病預防控制所,北京,100071)

何湘,姜錚,王雪松,劉大偉,郭燕紅,袁靜,HE Xiang,JIANG Zheng,WANG Xue-Song,LIU Da-Wei,GUO Yan-Hong,Yuan Jing(中國人民解放軍,疾病預防控制所,北京,100071)

甄清,ZHEN Qing(吉林大學,公共衛生學院,吉林,長春,130021) 

刊 名： 生物技術通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號： Q78  關鍵詞： NOD1   NF-κB   真核表達   螢光素酶報告基園  

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