利用多重PCR反應(yīng)同時(shí)篩選番茄Cf-9和Tm-1基因

利用同一PCR反應(yīng)體系,對(duì)分別與番茄抗葉霉病的Cf-9基因和抗番茄煙草花葉病毒病的Tm-1基因緊密連鎖的PCR標(biāo)記進(jìn)行了同時(shí)擴(kuò)增篩選,擴(kuò)增的特異性片段與單引物擴(kuò)增片段吻合.其中與Cf-9基因緊密連鎖的CAPs標(biāo)記在抗感試材均可擴(kuò)增出560bp的特異片段,且都存在TaqⅠ酶切位點(diǎn),抗病基因型酶切后分別產(chǎn)生了450bp、330bp和290bp的不同特異性片段,而感病基因型試材酶切后產(chǎn)生450bp和290bp的特異性片段;與Tm-1基因緊密連鎖的SCAR標(biāo)記為顯性標(biāo)記,只有抗病試材產(chǎn)生750bp的特異片段,不能被TaqⅠ酶切.經(jīng)反復(fù)驗(yàn)證,結(jié)果穩(wěn)定準(zhǔn)確,可用于在同一PCR反應(yīng)體系中對(duì)兩個(gè)抗病基因進(jìn)行同時(shí)篩選鑒定.該體系的建立不僅省時(shí)、省工、節(jié)省費(fèi)用,而且可用于苗期輔助選育,加快番茄抗病育種進(jìn)程.

作 者： 宋燕 陳麗靜 李君明 張智 李天來(lái) 徐和金 周永健 SONG Yan CHEN Li-jing LI Jun-ming ZHANG Zhi LI Tian-lai XU He-jin ZHOU Yong-jian   作者單位： 宋燕,李君明,張智,徐和金,周永健,SONG Yan,LI Jun-ming,ZHANG Zhi,XU He-jin,ZHOU Yong-jian(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所,北京,100081)

陳麗靜,CHEN Li-jing(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所,北京,100081;沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心,沈陽(yáng),110161)

李天來(lái),LI Tian-lai(沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,沈陽(yáng),110161) 

刊 名： 植物遺傳資源學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF PLANT GENETIC RESOURCES  年，卷(期)： 2006 7(2)  分類號(hào)： Q94  關(guān)鍵詞： 番茄   多重PCR反應(yīng)   葉霉病   番茄煙草花葉病毒病  

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