HeLa細(xì)胞端粒酶的分離純化及其蛋白質(zhì)組分的研究

根據(jù)端粒酶含有蛋白質(zhì)組分和RNA組分的特點(diǎn),采用寡核苷酸親和純化法從HeLa細(xì)胞蛋白粗提物中分離純化人類端粒酶,純化產(chǎn)物以TRAP法檢測其延伸端粒活性,并采用RNA印跡法進(jìn)行鑒定,然后從純化產(chǎn)物中分離蛋白質(zhì)組分,以SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測其蛋白質(zhì)亞基成分,可見到4種蛋白質(zhì)亞基成分,與蛋白質(zhì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)比較,有兩條位置接近212.2 ku,一條接近116.0 ku,一條接近42.7 ku.結(jié)果表明,蛋白質(zhì)寡核苷酸親和純化法一步性分離純化HeLa細(xì)胞端粒酶可得到端粒酶活性片段.

作 者： 周俊宜 羅超權(quán) ZHOU Jun-Yi LUO Chao-Quan   作者單位： 中山醫(yī)科大學(xué)生化教研室,廣州,510080  刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(4)  分類號(hào)： Q756  關(guān)鍵詞： 端粒酶   親和純化   蛋白質(zhì)   TRAP   HeLa細(xì)胞   寡核苷酸  

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