人骨髓間充質干細胞體外培養及鑒定

目的:體外分離、培養、鑒定人骨髓間充質干細胞(hBMSC).方法:利用密度梯度離心法分離出人骨髓單個核細胞(MNC),通過貼壁篩選法建立hBMSC的體外培養體系,并通過一系列檢測方法對所培養的細胞進行鑒定.結果:細胞主要呈"成纖維樣",但體積較大、形狀不規則、細胞質突起多,細胞核大而疏松,核仁明顯.流式細胞儀檢測:CD34陽性率為2.09%、CD29陽性率為94.46%;CD54及CD105表達陽性.細胞周期及透射電鏡檢測提示細胞處于相對原始狀態.免疫細胞化學染色顯示:CD14、CD45、膠原蛋白Ⅱ呈陰性;CD106、CD166、纖維連接蛋白、波形蛋白及膠原纖維酸性蛋白呈陽性.細胞化學染色:糖原染色呈強陽性;堿性磷酸酶染色呈陰性.通過誘導分化培養可誘導出成骨細胞.結論:成功建立了穩定的hBMSC體外培養體系,按照此培養體系進行培養可獲得hBMSC.hBMSC可傳代培養,但在培養過程中細胞逐漸出現老化現象,且不能凍存.

作 者： 梁雪 粟永萍 孔佩艷 陳幸華 彭賢貴 徐輝 曾東風 艾國平 LIANG Xue SU Yong-ping KONG Pei-yan CHEN Xing-hua PENG Xian-gui XU Hui ZENG Dong-feng AI Guo-ping   作者單位： 梁雪,孔佩艷,陳幸華,彭賢貴,曾東風,LIANG Xue,KONG Pei-yan,CHEN Xing-hua,PENG Xian-gui,ZENG Dong-feng(第三軍醫大學附屬新橋醫院血液科,重慶,400037)

粟永萍,徐輝,艾國平,SU Yong-ping,XU Hui,AI Guo-ping(預防醫學院解放軍復合傷研究所創傷、燒傷與復合傷國家重點實驗室,重慶,400038) 

刊 名： 醫學研究生學報  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES  年，卷(期)： 2007 20(5)  分類號： Q813.11  關鍵詞： 人骨髓間充質干細胞   造血微環境   細胞培養  

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