蚯蚓纖溶酶(EFE-3D)基因的合成及其在畢赤酵母中的表達

選擇畢赤酵母偏愛密碼子,分成32個長約48 bp且相互配對的寡核苷酸片段,合成蚯蚓纖溶酶基因EFE-3D.寡核苷酸片段經5'磷酸化后,通過錯位拼接,PCR(聚合酶鏈式反應)一次性完成新基因的合成并且克隆至載體pPIC9K中.最后利用電穿孔法將新基因克隆至畢赤酵母表達系統并進行誘導表達,用免疫印記法檢測表達產物,最后利用纖維平板確定其表達產物的活性為3 500 mm2/mL,1 L發酵液相當于48 mg天然蚯蚓纖溶酶活性.

作 者： 秦奕輝 儲炬 黃文華 莊英萍 張嗣良 QIN Yi-hui CHU Ju HUANG Wen-hua ZHUANG Ying-ping ZHANG Si-liang   作者單位： 秦奕輝,儲炬,莊英萍,張嗣良,QIN Yi-hui,CHU Ju,ZHUANG Ying-ping,ZHANG Si-liang(華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室,上海,200237)

黃文華,HUANG Wen-hua(上海國源生物技術有限公司,上海,200233) 

刊 名： 華東理工大學學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF EAST CHINA UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 32(4)  分類號： Q55  關鍵詞： 畢赤酵母   蚯蚓纖溶酶   基因合成   密碼子偏好性  

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