鯽魚酸性磷酸酶酶學特性及不同效應物對酶活力的影響

經NaAc-HAc緩沖液(pH5.0)抽提,正丁醇處理,硫酸銨分級沉淀,DEAE-32離子交換層析,SephadexG-150凝膠過濾純化,從鯽魚內臟中分離純化出電泳純的酸性磷酸酶.該酶提純倍數為30.82,比活力195.06U/mg.研究表明,該酶催化對硝基苯磷酸二鈉水解反應,最適pH 4.8,pH小于4和大于7時不穩定;最適溫度45℃,溫度高于50℃不穩定;米氏常數為0.23 mmol/L,利用SDS-PAGE測定酶亞基分子量為33.3 kD.化學修飾劑SUAN、PMSF、DTT、NBS對該酶活力影響不大,BrAc和IAe有明顯抑制作用.金屬離子對該酶催化活力有不同影響,Na~+、K~+、Ni~(2+)、Co~(2+)影響不顯著,Mg~(2+)、Ca~(2+)、Ba~(2+)、Mn~(2+)有激活作用,Ag~+、Cu~(2+)、pb~(2+)、Cd~(2+)有抑制作用,其中Mg~(2+)、Ca~(2+)、pb~(2+)、Cd~2對鯽魚酸性磷酸酶熒光光譜的影響表明金屬離子對酶活力的影響與酶構象改變有關.

作 者： 高舉 趙欣平 詹付鳳 張營 余同 GAO Ju ZHAO Xin-Ping ZHAN Fu-Feng ZHANG Ying YU Tong   作者單位： 四川大學生命科學學院,生物資源與生態環境教育部重點實驗室,成都,610065  刊 名： 水生生物學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2010 34(2)  分類號： Q556  關鍵詞： 酸性磷酸酶   純化   酶學性質   化學修飾   金屬離子   鯽魚   Acid phosphatase   Purification   Properties   Chemical modification   Metal ions   Carassias auratus  

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