HSV-1 UL30基因cDNA的克隆及篩選有效siRNA的融合載體構建

時間：2023-04-27 04:30:30 生物醫學論文我要投稿

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目的:克隆HSV-1 U130 cDNA并測序,構建pEGFP-N1-Fi融合表達載體,為靶向UL30基因的siRNA的設計和篩選奠定基礎.方法:從感染HSV-1 F株的病變VERO細胞提取總RNA,二次PCR擴增出UL30 cDNA并克隆至pEGFP-N1質粒,測序鑒定序列;將UL30 cDNA 4個小片段亞克隆至pEGFP-N1形成pEGFP-N1-Fi融合表達質粒,轉染VERO細胞,熒光顯微鏡觀察融合蛋白表達情況.結果:成功克隆出UL30 cDNA,序列對比顯示與基因庫中的HSV-1 F株UL30序列同源性為99.4%;成功構建pEGFP-N1-Fi融合表達載體并實現Fi-EGFP融合蛋白的表達.結論:成功克隆出UL30 cDNA,成功構建pEGFP-N1-Fi融合表達載體,為靶向UL30基因的siRNA的設計和篩選奠定基礎.

作者：何秋璟張春龍仁哲張美英朱欽昌劉秋英張佩琢王一飛 HE Qiu-jing ZHANG Chun-long REN Zhe ZHANG Mei-ying ZHU Qin-chang LIU Qiu-ying ZHANG Pei-zhuo WANG Yi-fei 作者單位：何秋璟,HE Qiu-jing(廣東醫學院,廣東東莞,523808;暨南大學生物醫藥研究與開放基地,廣東廣州,510632)

張春龍,ZHANG Chun-long(廣東醫學院衰老研究所,廣東東莞,523808;暨南大學生物醫藥研究與開放基地,廣東廣州,510632)

仁哲,張美英,劉秋英,王一飛,REN Zhe,ZHANG Mei-ying,LIU Qiu-ying,WANG Yi-fei(暨南大學生物醫藥研究與開放基地,廣東廣州,510632)

朱欽昌,ZHU Qin-chang(中科院廣州生物醫藥與健康研究所,廣東廣州,510663)

張佩琢,ZHANG Pei-zhuo(上海吉瑪制藥技術有限公司,上海,201203)

刊名：生物技術 PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2008 18(3) 分類號： Q782 關鍵詞： UL30基因/單純皰疹病毒1型分子克隆 EGFP 融合表達載體

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