五指山豬近交系精原干細胞體外培養研究

對不同發育階段五指山小型豬(WZSP)近交系的睪丸組織,采用不同的消化和培養方法進行了一系列的探索、研究.實驗顯示:培養SSCs的最佳時限為仔豬出生后1～20日齡;對不同日齡仔豬采用不同消化方法,以DMEM為基礎培養液并添加不同成分,34℃,5%CO2培養箱中飽和濕度條件下培養,可獲得較好的分離培養結果;原代SSCs在培養8d后,SSCs開始增殖,桑椹狀的SSCs集落半懸浮隆突生長;SSCs集落AKP染色,細胞呈陽性反應;對SSCs細胞團在STO飼養層上進行傳代培養,SSCs貼壁良好,培養4d左右大部分SSCs集落和單細胞消失;采用曲精細管組織貼壁培養法也同樣獲得桑椹狀SSCs集落,細胞集落在培養5d后出現,半懸浮生長.此外,睪丸組織在4℃PBS液中存放24h后,仍可作為SSCs分離、培養的材料.結果表明:本研究初步掌握了WZSP近交系精原干細胞體外分離、培養的技術方法,為其進一步深入研究提供了技術方法和操作依據.

作 者： 成鋼 馮書堂 CHENG Gang FENG Shu-Tang   作者單位： 成鋼,CHENG Gang(湖南文理學院,常德,415000)

馮書堂,FENG Shu-Tang(中國農業科學院畜牧研究所,北京,100094) 

刊 名： 生物工程學報  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(4)  分類號： Q813.1  關鍵詞： 五指山豬   SSCs   消化方法   日齡   體外培養  

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