成體狗骨髓間充質干細胞的分離和體外培養的初步研究

目的 探索成體狗骨髓間充質干細胞(MSCs)的分離、體外培養,為其將來應用提供實驗依據.方法 無菌條件下抽取狗肋骨骨髓,Ficoll分離液(密度1.077g/ml)梯度離心分離單個核細胞,在含10%新生牛血清的DMEM中,37℃、5%CO2、飽和濕度下常規培養,取貼壁細胞并進行傳代,觀察細胞的生長形態.結果 取得較高純度的成體狗骨髓MSCs,并保持細胞的活性;成體狗骨髓MSCs在體外培養中,為貼壁生長的單個核球形細胞,培養3～4d后開始大量增殖,為紡錘形和星形多突起的細胞貼壁生長,6～8d細胞達到70%～90%融合.傳代細胞3～4d即可再次傳代.結論 采用Ficoll分離液進行梯度離心分離,可獲較高純度的MSCs,是實用、便捷和可行的方法 ;而且在體外培養的條件下能大量增殖,形成形態均一的細胞集落,可以成為進一步進行細胞擴增或其它實際應用的基礎.

作 者： 雷開鍵 杜一平 姜雄 熊永祥 賈鈺銘 宋玉光 林萍 羅華   作者單位： 宜賓市第二人民醫院腫瘤科,四川,宜賓,644000  刊 名： 四川醫學  ISTIC 英文刊名： SICHUAN MEDICAL JOURNAL  年，卷(期)： 2007 28(10)  分類號： Q813.1  關鍵詞： 間充質干細胞   細胞培養   體外   骨髓   狗  

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