4種金屬離子親和層析純化重組類人膠原蛋白的效果比較

對利用金屬離子親和層析純化重組類人膠原蛋白過程中使用的金屬離子進行了比較,從而對分離純化的條件進行優化.在相同實驗條件下,用4種金屬離子柱分離純化目的蛋白.結果顯示,經4種金屬離子柱純化后鎳柱的總蛋白收獲率最高,銅柱與鋅柱居中,鈣柱最低;而柱保留時間則為鋅柱最高(12.38 min),鈣柱最低(8.25 min);鈣柱洗脫時所需咪唑解離初始濃度最低(100 mmol/L),鋅柱最高(200 mmol/L);對SDS-PAGE電泳圖進行分析得純化后類人膠原蛋白的純度分別為:鎳柱82.8%,銅柱83.4%,鋅柱96.2%,鈣柱94.3%.由此可見鋅柱對目標蛋白的親和力最高,且純化后類人膠原蛋白的純度也最高.因此,確定鋅離子作為親和層析純化重組類人膠原蛋白的金屬離子.

作 者： 王曉軍 范代娣 WANG Xiao-jun FAN Dai-di   作者單位： 王曉軍,WANG Xiao-jun(西安工程大學,環化學院,陜西,西安,710048)

范代娣,FAN Dai-di(西北大學,化工學院,陜西,西安,710069) 

刊 名： 應用化工  ISTIC 英文刊名： APPLIED CHEMICAL INDUSTRY  年，卷(期)： 2009 38(6)  分類號： O636  關鍵詞： 重組類人膠原蛋白   金屬螯合親和層析   金屬離子   純化  

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